□广州市第一人民医院鹤洞分院 邓穗德副主任技师
(四)尿素氮
由食物消化而来及组织分解蛋白质而来的氨基酸大部分被肝细胞摄取,通过肝内富含与氨基酸分解代谢有关的酶类作用,经转氨基、脱氨基、转甲基、脱硫及脱羧等反应转化成酮酸和其它化合物。除亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸这三种支链氨基酸主要在肌肉组织降解外,其它氨基酸特别苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸等芳香族氨基酸都主要在肝内分解代谢。肝是合成尿素的主要器官,当肝细胞严重受损发生功能障碍时,会引起血中氨基酸和血氨浓度均增高,而血中尿素氮浓度减少。
1.测定尿素氮的检测方法和原理
(1)脲酶-波氏原理:尿素经脲酶(尿素氨水解酶,EC3.5.1.5)水解为二分子氨和一分子二氧化碳,氨离子的量化在碱性介质中通过酚及次氯酸钠反应形成蓝色吲哚酚化合物。此反应过程需要用亚硝基铁氰化钠催化反应,经分光光度计在630nm波长测定。
(2)酶偶联速率法原理:尿素被脲酶催化下,水解生成氨和二氧化碳,氨离子在谷氨酸脱氢酶(GLD)的作用下与2-氧戊二酸和NADH反应,在生成谷氨酸的同时也使还原型NADH被氧化成氧化型NAD+。NADH在340nm波长处有一最高吸收峰,其吸光度下降的速度与待测样品中尿素氮含量成比例。
(3)二乙酰一肟显色法原理:在酸性环境中加热,二乙酰与尿素缩合形成色素原二嗪化合物,由于二乙酰一肟和二乙酰酸产生的二乙酰不稳定,所以需加入氨基硫脲和Fe3+稳定颜色。缩合生成的红色二嗪(Diazine)化合物在540nm波长下比色,吸光度与尿素氮含量成正比。
2.实验评价
(1)为便于临床诊断,尿素和尿素氮可作为同义词,而化学结构是一分子尿素含二个氮原子,在实验报告中应加以注意。尿素等于血液尿素氮乘以2.14;反之,血液尿素氮等于尿素乘以0.46。转换公式:
尿素: mg/dl×0.1665=mmol/L;
尿素氮: mg/dl×0.3561=mmol/L。
(2)在测定中,各种器皿及蒸馏水应无氨离子污染,氨会使结果偏高。
(3)标本最好用血清。
3.参考值及临床意义
(1)参考值
年龄 参考范围
(单位:岁) (单位:mmol/L) (单位:mg/dl)
成人 2.8~7.1 17~43
男 小于50 3.2~7.3 19~44
男 大于50 3.0~9.2 18~55
女 小于50 2.6~6.7 15~40
女 大于50 3.5~7.2 21~43
儿童 1~3 1.8~6.0 11~36
4~13 2.8~6.0 15~36
14~19 2.9~7.5 18~45
(2)生理生化及临床意义
尿素是蛋白质和氨基酸的最终产物,在肝脏中合成。在蛋白质代谢中分解为氨基酸并脱氨,产生的氨并在线粒体中通过称之为尿素循环的一系列反应转变为尿素。营养性的蛋白质通常以均值的氮含量16%计算,这种氨有90%以上不被代谢过程所利用而被转化为尿素。成人每天约产生16g尿素。
血液尿素氮浓度受多种因素影响,生理性因素受成人的日间变动、妊娠妇女及蛋白质饮食量的影响。
病理因素受肾性疾病或上消化道出血等引起血液尿素氮升高。血尿素氮减少往往表示严重的肝病合并广泛肝坏死。